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        數據分享 || 通用型Transpro瞬轉培養基體系

        2020-09-02

        Transpro瞬轉培養基體系包括Transpro CD01和Transpro feed 1。培養基體系中的Transpro CD01是一種通用型瞬轉培養基,可同時用于HEK293細胞和CHO細胞的傳代培養、高密度培養和瞬時轉染培養,瞬時轉染過程中不需要離心換液,在蛋白表達和病毒包裝等瞬轉過程中,配套瞬轉補料Transpro feed 1可以進一步提高瞬轉蛋白表達量。Transpro瞬轉培養基體系適合采用HEK 293、Expi293、293F、293E等HEK293系列細胞和ExpiCHO、CHOS等CHO系列細胞進行研發過程中抗體、重組蛋白和病毒的瞬時轉染表達培養。該體系產品是完全化學成分限定、無動物來源成分、無蛋白成分、無動物或植物來源蛋白水解物、無生長因子,從而避免水解物帶來的批次差異性問題。


        細胞馴化

        多數細胞株使用本產品是不需要任何馴化,直接接種到本培養基,傳代三次以上即可。對有些細胞株,使用本系列培養基時可能要采用梯度連續馴化。

        連續傳代 

        按照接種密度0.5×106cells/mL,2天傳代,連續傳代10次,Expi293活細胞密度可以穩定在2.5×106cells/mL左右,293F活細胞密度可以穩定在2.0×106cells/mL左右,活力均大于98%,細胞形態規則圓整,生長倍增時間正常;

        按照接種密度0.3×106cells/mL,2天傳代,連續傳代10次,ExpiCHO活細胞密度可以穩定在2.8×106cells/mL左右,活力均大于98%,細胞形態規則圓整,生長倍增時間正常。


        Batch培養

        按照接種密度0.5×106cells/mL,培養7天,過程補加葡萄糖,Expi293最高活細胞密度可至16×106cells/mL左右,293F最高活細胞密度可至9×106cells/mL左右,ExpiCHO最高活細胞密度可至20×106cells/mL左右。

        蛋白瞬轉 

        ①轉染前一天按照2.0×106cells/mL密度接種,培養第二天細胞密度可至4.0×106cells/mL左右;

        ②培養第二天細胞計數后,細胞活率>95%,活細胞密度≥4.0×106cells/mL,可直接使用;若細胞密度低于4.0×106cells/mL,可通過離心(800rpm,5 min)收集細胞,將細胞以4.0×106cells/mL密度重懸于Transpro CD01培養基中;

        ③按照優化后的瞬轉工藝,制備DNA和PEI混合液;

        ④將混合液加入到培養液中,進行培養;

        ⑤培養18h后,建議補加補料培養基Transpro feed 1 (濃度建議為初始培養體積3-5%),可進一步提高活細胞密度和蛋白表達量。

        ⑥培養至6天,結束培養。


        上方數據表明,Expi293、293F和ExpiCHO在Transpro CD01培養基上均可獲得高水平的瞬轉效果,從而滿足瞬轉蛋白和病毒包裝的需求。與國外競爭產品對比,均可獲得優越的效果,國內客戶采用Transpro CD01瞬轉培養基,結合優化的培養工藝,CHO瞬轉上最高可達1800mg/L的表達量,293瞬轉上最高可達1000mg/L的表達量。


        產品名稱

        貨號

        Transpro   CD01

        MS002-1L

        Transpro   feed 1

        F002-500mL




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